Биохимические показатели крови человека при сальмонеллезной интоксикации

Реферат.

Дипломная работа на тему: «Биохимические показатели крови человека

при сальмонеллезной интоксикации» содержит 46 страниц печатного текста,

таблиц, 8 рисунков, 59 использованных источников литературы, из них 10

иностранных.

Перечень ключевых слов: сальмонеллез, перекисное окисление липидов,

циркулирующие иммунные комплексы, каталаза, молекулы средней массы,

сывороточный альбумин, эндогенная интоксикация.

Объект исследования: сыворотка крови практически здоровых людей и

больных сальмонеллезом г. Пензы.

Практическое применение: в здравоохранении.

Список сокращений.

ПОЛ – перекисное окисление липидов;

ЦИК – циркулирующие иммунные комплексы;

ЧСА – человеческий сывороточный альбумин;

МДА – малоновый диальдегид;

ПЭГ – полиэтиленгликоль;

АОС – антиокислительная способность;

АТ – антитело;

АГ – антиген;

ИК – иммунный комплекс;

ЛПС – липополисахаридный комплекс;

МСМ – молекулы средней массы;

ТБК – тиобарбитуровая кислота;

ЭКА – эффективная концентрация альбумина;

ОКА – общая концентрация альбумина;

ТХУ – трихлоруксусная кислота;

ЦНС – центральная нервная система;

ц-АМФ – циклический аденозинмонофосфат;

АФК – активные формы кислорода;

LOOH, HOOH – гидроперекиси;

СОД – супероксиддисмутаза.

Содержание.

|Введение……………………………………………………………….. |5-6 |

| | |

|Обзор литературы ………………………………………………... |7-19 |

|Биохимическая характеристика интоксикации при сальмонеллезной | |

|инфекции…………………………..…….. |7-11 |

|Молекулярные механизмы развития эндогенной | |

|интоксикации при сальмонеллезе……………………..….. |11-14 |

|Показатели уровня эндогенной интоксикации | |

|организма при сальмонеллезе………………………………. |14-19 |

| | |

|Материалы и методы исследования…………………………. |20-25 |

|Материалы исследования……………………………………. |20 |

|Методы исследования………………………………………… |20-25 |

| | |

|Результаты и обсуждение………………………………….…… |26-34 |

|Определение показателей уровня интоксикации в | |

|сыворотке крови практически здоровых людей…….. |26-27 |

|Определение показателей уровня интоксикации в | |

|сыворотке крови больных сальмонеллезом………….….. |28-34 |

| | |

|Список использованных источников……………………….….. |35-40 |

| | |

|Выводы…………………………………………………………………. |41 |

| | |

|Приложения……………………………………………………………. |42-46 |

Введение

Успехи в борьбе с инфекционными заболеваниями в нашей стране

общепризнанны. Вместе с тем в инфектологии еще остаются проблемы, имеющие

серьезное социально-экономическое значение для всех стран мира. К их числу

относятся острые кишечные инфекционные заболевания [1].

Сальмонеллез – группа острых кишечных инфекционных болезней,

вызываемых бактериями рода Salmonella, характеризующихся значительным

полиморфизмом клинического течения, частым наличием интоксикации,

лихорадки, признаков поражения желудочно-кишечного тракта [2].

Крупные достижения отечественных и зарубежных исследователей,

установивших патогенетическое значение нарушения биологической регуляции

при острых кишечных инфекциях, дали новый импульс в изучении патогенеза

сальмонеллеза [3].

Иммунная система представляет собой сложную многокомпонентную систему

из быстроделящихся и покоящихся клеток. Она является высокочувствительной к

воздействию токсинов бактерий. Это приводит к нарушению иммунорегуляторных

процессов.

Наиболее информативными являются показатели состояний прооксидантно-

антиоксидантного равновесия, которое при усилении действия на организм

токсинов смещается в сторону активизации ПОЛ, уровня холестерина, ЦИК, Ит,

МСМ.

ПОЛ – это фундаментальный универсальный молекулярный механизм,

лежащий в основе устойчивости и адаптационных возможностей организма. В

норме ПОЛ обеспечивает условие для жизненно важных функций клетки, в случае

же интоксикации становится пусковым механизмом патобиохимических изменений

в организме человека.

Целью моей дипломной работы является изучение биохимических

показателей эндотоксикоза в динамике патологического процесса. В задачи

исследования входило:

1. Определение содержания МДА, уровня холестерина, ЦИК, Ит, МСМ и

активности каталазы в группе контроля, которую составили практически

здоровые люди.

2. Определение содержания МДА, уровня холестерина, ЦИК, Ит, МСМ и

активности каталазы у больных сальмонеллезом.

3. Исследование изменения изучаемых показателей у больных в зависимости

от степени тяжести заболевания.

1. Обзор литературы

1. Биохимическая характеристика интоксикации при

сальмонеллезной инфекции

Сальмонеллезы принадлежат к числу инфекционных заболеваний, весьма

широко распространенных на всех континентах мира. Возбудителем

сальмонеллезов являются микроорганизмы, принадлежащие к роду Salmonella,

семейства кишечных Enterobacteriaceae.

Сальмонеллы – это мелкие бактерии вытянутой формы с

закругленными концами длиной от 1 до 3 и диаметром 0,5-0,8 нм [4].

Сальмонеллез встречается чаще у жителей городов, чем сел, что

связывается с лучшей регистрацией заболеваемости, наличием множественных

детских учреждений, широким употреблением пищевых полуфабрикатов.

Заболевание отмечается круглый год, но максимальное число регистрируется в

теплое время года, что объясняется благоприятными условиями размножения

сальмонелл в пищевых продуктах и реализации инфекции [5].

Таблица 1.1.1.

Статистические данные больных сальмонеллезом г. Пензы.

|1996 |187 |34,9 |362 |23,1 |

|1997 |140 |26,1 |316 |20,3 |

|1998 |230 |43,0 |448 |28,8 |

В возникновении сальмонеллеза ведущую роль играют живые бактерии,

гибель которых в организме больного сопровождается развитием

эндотоксинемии. Принято выделять два вида токсичных продуктов

жизнедеятельности микробов-экзотоксии и эндотоксии. К экзотоксинам отнесены

токсичные продукты жизнедеятельности бактерий, активно (при жизни)

секретируемые в окружающую среду, а к эндотоксинам – те ядовитые для

макроорганизма продукты жизнедеятельности, которые освобождаются только при

лизисе микробной клетки [6].

Кроме токсина палочка имеет ряд антигенов клеточной стенки. О-антиген

расположен на поверхности микробной клетки и представляет собой

фосфолипидно-полисахаридный комплекс, включающий 60 % полисахарида, 20-30 %

липида и 3-4,5 % гексозамина. Н-антиген определяется жгутиками.

Поверхностные антигены клеточной стенки провоцируют типоспецифический

антительный ответ, а глубинные – видоспецифический [6,7].

При сальмонеллезе развитие и тяжесть симптомов обусловлены

интоксикацией и обезвоживанием. По мнению А.Ф. Билибина интоксикация –

явление сложное, сводящееся к изменению нервнорефлекторной деятельности и

гуморальной регуляции с обменными сдвигами. К.В. Бунин в основу синдрома

интоксикации ставит воздействие токсина на :

1) падение артериального давления, снижение сократительной способности

миокарда;

2) гормональную регуляцию водно-солевого обмена с изменениями биосинтеза

гормонов в коре надпочечников с угнетением процесса их метаболизма;

3) функцию почек (снижение клубочковой фильтрации, повышение канальцевой

реабсорбции воды, снижение концентрации очищения мочевины) [8].

Сальмонеллезная интоксикация возникает как результат патологии

первичного ответа на инфекционный агент вследствие значительных потерь воды

и электролитов с рвотой и жидким стулом. По мере увеличения дефицита воды и

электролитов на первый план выступают симптомы обезвоживания и поражения

ЦНС. Если процесс прогрессирует, обезвоживание нарастает, появляются

признаки недостаточности кровообращения, которые при интоксикации имеют

клинику шока. Частая рвота и понос – первые признаки интоксикации [9].

Обязательным условием развития заболевания являются наличие большого

количества возбудителей и их токсинов, массовое проникновение антигенов в

кровь. Наибольшей токсичностью отличается липид А, вызывающий следующие

основные реакции: активацию лейкоцитов и макрофагов, стимуляцию выброса

эндогенного пирогена, антогониста глюкокортикоидов, интерферона,

интерлейкинов, подавление тканевого дыхания, активацию системы комплемента,

тромбоцитов, факторов свертывания крови другие [10,11], [рис. 1.1.1].

Главной причиной развития шока при сальмонеллезе считается не

повреждающее действие самих микробов или их токсинов, а своеобразный ответ

организма на них. Под токсико-инфекционным шоком следует понимать

экстремальное состояние организма, наступающее в результате действия

токсичных субстанций возбудителей, патогенных иммунных комплексов на органы

и ткани организма, сопровождающееся острым нарушением метаболизма в них

[12].

Схематическое изображение липополисахаридов

стенок микробов.

Рис. 1.1.1.

С.А. Степанов с помощью аспирационной биопсии обнаружил в тонкой

кишке больных сальмонеллезом изменение эпителия, острое воспаление

слизистой оболочки, нарушение микроциркуляции и сосудистой проницаемости.

К.Х. Ходжаев в эксперименте на крысах показал, что сальмонеллезная инфекция

вызывает нарушение процесов тканевого дыхания и фосфорилирования. Состояние

поджелудочной железы изучено Белянской Т.А. В острый период болезни

отмечено снижение ферментативной активности панкреатического сока – уровень

трипсина был снижен в 71 % случаев, липазы в 55 %, амилазы – в 66 %.

Таким образом эндотоксин вызывает активацию синтеза, преимущественно

протеолитических ферментов, задержку экструзии секретируемых проэнзимов,

что приводит к секреции и поступлению ферментов в лимфатическое и

кровеносное русло [13,14].

При сальмонеллезе развивается обезвоживание, обусловленное потерей

внеклеточной жидкости, а при тяжелом течении заболевания и части клеточной.

Дегидратация в большинстве случаев имеет изотонический характер, сочетаясь

с развитием сгущения крови, дефицитом электролитов, метаболическим ацидозом

в капиллярной и венозной крови [15], [рис. 1.1.2].

2. Молекулярные механизмы развития эндогенной

интоксикации при сальмонеллезе

Явления интоксикации вызывают заболевания, сопровождающиеся

повышенным распадом тканей, усиленными процессами катаболизма,

недостаточностью функции печени и почек, снижением процессов

микроциркуляции [16].

В ответ на действие первичного патогена, которым являются

эндотоксины, сальмонелл, в организме развиваются типовые каскадные реакции,

что лежит в основе современной концепции СЭИ.

На Международном симпозиуме в Санкт-Петербурге (1994 г) было дано

определение этого синдрома как клинического синдрома с проявлением

симптомов интоксикации при патологических состояниях неоднородных по

этиологии и обуславливающих накопление в тканях и биологических жидкостях

организма продуктов патологического обмена веществ, метаболитов,

деструкции клеточных и тканевых структур, разрушения белковых молекул

[17,18].

Шано В.П. с соавторами подчеркивает, что токсическое влияние

липополисахаридной субстанции эндотоксина проявляется комплексом нарушений,

обусловленных повреждением как циркулирующих клеток в кровотоке, так и

эндотелиоцитов, эозинофилов, нейтрофилов, макрофагов, следствием чего

является выброс в кровоток ряда биологически активных веществ – цитокинов,

интерлейкинов. Главной точкой приложения эндотоксина являются

эндотелиальные клетки, активация их приводит к высвобождению простациклина,

выделению эластазы, токсических метаболитов кислорода, факторов активации

тромбоцитов и комплемента с высвобождением терминального комплекса

комплемента, брадикинина с последующим формированием синдрома повышенной

проницаемости капилляров. Это приводит к тому, что в очаг воспаления

начинают входить компоненты крови, прежде всего фибриноген и тромбоциты.

Фибрин способствует агрегации тромбоцитов, полимеризации фибрина и –

возникновению тромбов. Следствием тромбоза являются нарушения

микроциркуляции с последующей гипоксией, что приводит к дальнейшим

повреждениям клеток в очаге воспаления. Метаболическим результатом этого

является изменение аэробного метаболизма клеток на анаэробный, повышенное

продуцирование лактата и протонов, снижение показателей рН [19].

Среди тканевых (клеточных) медиаторов воспаления важное место

занимают простагландины. Исходными продуктами для биосинтеза

простагландинов являются ненасыщенные жирные кислоты: линолевая,

арахидоновая, пентаноевая. Наибольшее значение имеет в организме

арахидоновая кислота, которая содержится в фосфолипидах клеточных мембран.

Простагландины вызывают сильное диуретическое и натрийуретическое

действие, оказывают разнообразное действие на желудочно-кишечный тракт. Они

могут стимулировать и тормозить сокращение и секреторную активность тонкой

кишки, тормозят секрецию соляной кислоты слизистой оболочки желудка.

Простагландины вызывают секрецию воды и электролитов в просвет кишки,

вызывая диарею, повышают концентрацию ц-АМФ в слизистой оболочке тонкой

кишки, влияют на прочность и упругость эритроцитарной мембраны [20, 21, 22,

49].

3. Показатели уровня эндогенной интоксикации

организма при сальмонеллезе

Анализируя данные литературы за последние десятилетия, можно сказать,

что основными показателями интоксикации при сальмонеллезе являются ПОЛ,

уровня холестерина, ЦИК, ИТ, МСМ и активность каталазы. При развитии

интоксикации на фоне сальмонеллеза происходит активный хемотаксис

нейтрофиллов в очаг воспаления, где они поглощая и переваривая чужеродный

агент, изменяют свою метаболическую активность, характеризующуюся

усилением поглощения кислорода, повышенной утилизацией глюкозы и

гиперпродукцией АФК ([pic]) [23, 24].

Перекисное окисление является универсальным механизмом взаимодействия

кислорода со многими органическими субстратами, в том числе с липидами.

Внедрение кислорода в молекулы окисленного субстрата приводит к образованию

реакционно-способных промежуточных продуктов – свободных радикалов,

гидроперекисей, которые в дальнейшем вызывают повреждение других классов

соединений – белков, нуклеиновых кислот, углеводов (рис. 1.3.1).

Метаболизм супероксидного радикала в норме

и при патологии (Владимиров Ю.Я., 1998)

Рис. 1.3.1.

Накопленные к настоящему времени данные литературы позволяют сделать

вывод о том, что свободнорадикальное окисление липидов при сальмонеллезной

инфекции играет определенную патогенетическую роль [25, 50].

Установлено, что при развитии ПОЛ в биомембранах понижается

содержание легкоокисляемых полиненасыщенных жирных кислот и изменяются

физико-химические свойства: микровязкость, текучесть, мембранный потенциал,

полярность внутренних областей мембран. Таким образом, изменяются

транспортные свойства мембраны и активность ферментов [26].

Регуляция свободнорадикального окисления обеспечивается в клетке

системой антиоксидантной защиты. Так, накапливающаяся в процессе ПОЛ

перекись водорода обезвреживается с помощью каталазы, присутствующей во

всех тканях организма. Каталаза (КФ 1.11.1.6.) представляет собой

гемсодержащий фермент с молекулярной массой около 250000 Д, локализованный

в пероксисомах клеток [27].

Митохондриальная каталаза участвует в оксидазном пути окисления,

сопровождающемся запасанием энергии в виде АТФ. Блокирование транспорта

электронов в дыхательной цепи приводит к стимуляции пероксисомального

окисления. При потологиях, связанных с нарушением энергетических процессов,

каталаза пероксисом может выходить из них и участвовать в окислении на

мембранах эндоплазматического ретикулума [28, 53].

В работе Л.Б. Оконенко с соавторами о состоянии антиоксидантной

системы судили по активности СОД, глутатионпероксидазы и каталазы, анализ

данных выявил дефицит антиоксидантов [29, 30].

При инфекционном токсикозе в мембранах эритроцитов резко снижается

содержание общих фосфолипидов, но увеличивается количество НЭЖК и

лизофосфотидилхолина, что косвенно указывает на повышение активности

фосфолилаз, которые избирательно разрушают липиды мембран. Холестерин

подвергается как активному, так и пассивному обмену в мембранах эритроцитов

[29]. Фермент лецитинхолестеролацил трансфераза превращает эфиры

холестерина в свободный холестерин и тем самым регулирует уровень

свободного холестерина в плазме, что способствует проникновению его в

мембраны. Следовательно, инактивация этого фермента в результате гипоксии

при эндотоксикозе ведет к повышению уровня эфиров холестерина в мембранах

эритроцитов [31,32].

Наряду с уровнем МДА, активности каталазы и уровня холестерина для

диагностики заболевания и его прогноза имеют значение и другие

неспецифические показатели – ЦИК, Ит, МСМ.

Синтезирующиеся при формировании иммунитета специфические антитела

обладают способностью взаимодействовать с антигенами возбудителей и тем

самым вызывать нейтрализацию патогенных микробов и их токсинов. Эта реакция

сопровождается образованием иммунных комплексов антиген – антитело [33, 34,

54, 55]. При патологических состояниях образование ИК выходит из под

контроля, в результате чего развивается та или иная болезнь ИК [рис.

1.3.2.].

Патогенетические механизмы болезней иммунных

комплексов (Сура В.В., 1987)

Рис. 1.3.2.

В результате развития эндотоксемии при сальмонеллезе организм

длительное время контактирует с избытком АГ как экзогенного (компоненты

микробных клеток), так и эндогенного (компоненты разрушенных клеток самого

организма) происхождения. Вместе с тем наблюдается угнетение системы

комплемента, ответственного за лизис микробных клеток. В этих условиях

значительного избытка АГ и недостаточности выработки АТ может привести к

образованию ИК, которые способны откладываться в определенных тканях и

вызывать острые воспалительные реакции. При значительных отложениях

наблюдаются функциональные и морфологические повреждения органов и тканей

[35].

Связываясь с клеточной мембраной ЦИК вызывают выделение в окружающую

Страницы: 1, 2, 3

МЕНЮ

Биохимические показатели крови человека при сальмонеллезной интоксикации

Биохимические показатели крови человека при сальмонеллезной интоксикации

ИНТЕРЕСНОЕ