Состояние естественной резистентности и иммунологической реактивности у новорожденных телят при колибактериозе

воздействием различных факторов окружающей среды. Неблагоприятное

воздействие окружающей среды приводит к ослаблению устойчивости организма

и, как правило, к возникновению и распространению различных заболеваний, в

том числе и инфекционных. Организм животных в процессе внутриутробного

развития продуцирует клетки, осуществляющие фагоцитоз и молекулы с

выраженным противомикробным действием — лизоцим, комплемент, пропердин,

иммунные глобулины и другие факторы естественной резистентности. С

возрастом животных они динамически изменяются [С. J. Howard, A. A. Glynn,

1971; В. В. Никольский, В. П. Литвин, 1974; П. А. Емельяненко, 1979; В. Т.

Сидоров, 1984; B. C. Шипилов, В. К. Копытин, 1984; R.M. Miller, A.J.

Guidry, M.J. Poape, 1988; G. Mulcahy, P.J. Gunn, 1988; С. И. Плященко,

1991].

Иммунологическая реактивность у новорожденных телят формируется

постепенно и достигает полноценной выраженности только на определенном

уровне их индивидуального физиологического развития [B. C. Бузлама, С. М.

Сулейманов, В. Н. Долгополов, Н. Н. Коновалов, М. Н. Рецкий, И. С.

Толкачев, Т. И. Агеева, 1978].

В качестве критериев степени реактивности животного организма используют

[В. В. Никольский, В. П. Литвин, 1974]: динамику накопления антител,

колебание бактерицидной активности крови, опсоно-фагоцитарную реакцию,

специальную внутрикожную пробу и картину крови. В течение первых 10-15 дней

жизни у телят более выражена клеточная защитная функция организма,

характеризующаяся активным фагоцитозом микроорганизмов. Так, опсоно-

фагоцитарный показатель по отношению к кишечной палочке в первые 10-15 дней

жизни равнялся 8, в 30-40 дней — 3,7 а в 60-70 дней — 1,4. Сходные

результаты получены при изучении гуморальных защитных факторов организма.

Фагоцитарная способность лейкоцитов в крови играет большую роль в

противомикробной защите новорожденного теленка. По данным исследователей,

фагоцитарная активность гранулоцитов крови новорожденных телят до выпойки

молозива летом (июнь-июль) достигает 98-100 % (у матерей 90-95 %).

Фагоцитарное число (8-16) несколько ниже, чем в крови коров-матерей (16-

19). Активность лизоцима по лизису тест-микроба в агаровом геле определяли

в сыворотке крови телят и молозиве коров-матерей. Количество лизоцима в 5

первых порциях молозива равно 13±0,26 мкг/мл, в сыворотке крови

новорожденных телят до выпойки молозива — 12±0,69, на 10-й день — 13,4±0,61

и в 3 месяца — 12,5±0,017. Таким образом, авторы не установили различий в

содержании лизоцима в сыворотке крови телят в разных возрастных периодах

[С. Н. Преображенский, Н. И. Блинов, Н. В. Ершова, Г. В. Вышинский, 1974].

В университете штата Оклахома, национальной лаборатории по изучению

болезней животных в США и Гуэлфском университете Канада [O. Barta, V.

Barta, 1972] на плодах и новорожденных телятах определяли бактерицидную

активность крови. Двукратно разведенную сыворотку крови, в объеме 0,2 мл

смешивали с равным объемом взвеси культуры содержащей 104 мл клеток

бактерий кишечной палочки. Смесь выдерживали час при температуре 37° С и

0,1 мл ее высевали на плотную среду. Посевы выдерживали 16-18 ч при 37° С,

подсчитывали число колоний и определяли дозу сыворотки, задерживающую рост

50 % бактерий. Антитела определяли по реакции агглютинации и пассивной

гемагглютинации. Бактерицидная активность сыворотки крови составляла

соответственно (в 1 мл сыворотки, задерживающей рост 50 %) бактерий у

новорожденных телят 0,0036 и 0,0068.

При изучении иммунологической неспецифической реактивности организма

новорожденных телят, [П. А. Емельяненко, 1979] определял фагоцитарную

активность нейтрофилов и моноцитов крови, а также содержание в ее сыворотке

лизоцима, комплемента и пропердина. Он установил, что у погибших телят от

острых желудочно-кишечных болезней достоверно снижался процент фагоцитоза

нейтрофилов, незначительно снижался уровень комплемента, пропердина и

лизоцима.

При иммунобиологическом исследовании крови и сыворотки крови определяют

[Д. Келмен, 1967; В. Я. Мозгис, 1982]:

a) фагоцитоз лейкоцитов по отношению к золотистому стафилококку 209р;

b) бактерицидную активность (БАСК);

c) активность бета-лизинов (БЛСК) сыворотки крови методом

фотонефелометрии. Сущность метода заключается в том, что микробы (в

данном случае, изолированный от телят штамм кишечной палочки —

штамм 83) в течение 5 и 14 ч соответственно подвергаются

воздействию исследуемой сыворотки. Чем слабее бактерицидная и

бетализиновая активность сыворотки, тем интенсивнее размножаются

микробы и тем более мутной становится взвесь;

d) лизоцимную активность сыворотки крови.

При круглогодовом стойловом содержании коров наступает угнетение

иммунологической реактивности, а родившиеся от них телята имеют пониженный

уровень гуморальных и клеточных факторов защиты организма (бактерицидная и

лизоцимная активность сыворотки крови, фагоцитоз, уровень иммуноглобулинов,

по сравнению с телятами, родившихся от коров, пользовавшихся выгулами и

пастбищами [С. И. Плященко, В. Т. Сидоров, А. Ф. Трофимов, 1990].

Все новорожденные до приема молозива обладали достаточно выраженной

фагоцитарной защитной реакцией. Показатели гуморальных факторов защиты

формировались в более позднем возрасте и были выражены значительно слабее.

До приема молозива сыворотка крови телят не обладала лизоцимной активностью

и не содержала гаммаглобулинов [М. А. Сидоров, В. Н. Гущин, 1984].

На скорость роста телят положительное влияние оказывает 5-дневный период

подсоса. Так, у таких телят были выше показатели естественной

резистентности (лизоцимная активность, общий белок, глобулины, фагоцитарное

число и фагоцитарный индекс) по сравнению с телятами, которых содержали с

матерями только 12 ч [В. П. Павличенко, О. В. Милованов, Н. Н. Берникова,

1985].

Реактивность и адаптация сельскохозяйственных животных две

взаимосвязанные проблемы; их надо изучать на организменном и

иммуноцитологическом уровнях в комплексе со многими причинными факторами

воздействующими на организм. Надо учитывать, что в каждом из указанных

процессов лежат конкретные механизмы поддержания гомеостаза и адаптации, во

многом еще не выясненные и требующие всестороннего изучения [А. Н. Голиков,

1989].

1.4. Получение и применение лактоглобулинов

В 1892 году P. Ehrlih впервые установил, что невосприимчивость к

различным токсинам передается через молоко.

Исходя из того, что молозиво и молоко иммунизированных коров обладают

выраженными превентивными свойствами, его использовали с профилактической и

лечебной целью при соответствующих заболеваниях [C. Briggs, 1951; С. И.

Губкин, А. И. Коган, 1971; J.E. Butler, C. Maxwele, 1972; P. Blackmer,

1973; D. M. Barber, 1978; D. M. Barber, 1979; J. J. Geene, 1984 В. Б.

Билоштан, 1985; С. В. Вальциферова, 1997].

Из молока были получены иммунные лактоглобулины против сальмонелл,

бруцелл, вируса ящура и полиомиелита [P. Lepine, 1963]. Эти препараты

оказались пригодными для применения с лечебной и профилактической целью не

только для телят, а и для обезьян. Автор приводит данные, подтверждающие

преимущества применения лактоглобулинов по сравнению с цельными иммунными

сыворотками молозива и крови.

Болгарские исследователи [К. Геров, П. Чушков, Р. Георгиева, 1965]

изготовили из молозива препарат, который назвали лактоплазмин. По мнению

авторов лактоплазмин содержит лактоглобулины, иммунные тела, витамины,

микроэлементы и, являясь биологически ценным продуктом, может быть

использован самостоятельно или в комбинации с другими средствами при

заразных и незаразных болезнях молодняка, при которых понижается общая

резистентность организма. Этот препарат является эффективным средством

профилактики и лечения различных видов расстройств пищеварения у телят.

В ветеринарно-бактериологическом институте Бернского университета

(директор профессор H. Fey) и научно-исследовательской лаборатории Бернской

ветеринарной школы (заведующий Graub) из иммунного молозива изготовлен

гамма-глобулиновый препарат (ГГП) или гамалин по Граубу [H. Fey, 1972].

Давая обзор работам, проведенным в этих учреждениях и анализируя

литературу по методам получения и результатам изучения свойств ГГП, [K.

Walser und H. Brumer, 1987] отмечают высокую терапевтическую и

профилактическую эффективность применения этого препарата при инфекционных

заболеваниях сельскохозяйственных животных. Они полагают, что наиболее

результативным будет применение препарата при колиинфекциях и

энтеротоксемиях.

Из молозива коров, иммунизированных внутривыменно против паратифа А. Ф.

Барабаш, 1966, выделил путем осаждения сернокислым аммонием специфический

противопаратифозный лактоглобулин. Полученный препарат применялся

парентерально и показал выраженные профилактические и лечебные свойства на

лабораторных животных и телятах.

Из молока коров, вакцинированных внутривыменно ящурным антигеном

изготовили иммунолактон против вируса типа А, а затем изготовили

бивалентный иммунолактон против вируса типа А и О [В. П. Онуфриев, В. К.

Журавлёв, К. В. Чунаев, А. И. Дудников, Ю. Ф. Швецов, Б. П. Мартьянов,

1967]. Введение иммунолактона лабораторным животным, поросятам и телятам в

дозе 0,5-1,5 мг на кг массы тела предохраняло животных от заболевания

ящуром. Авторы указывают, что от одной коровы со средней продуктивностью 10

л молока в сутки в течение месяца можно изготовить иммунолактон в

количестве, которое предохранит от ящура 300 телят или 800 поросят.

Иммунизируя стельных коров вначале подкожно концентрированным

адсорбированным столбнячным анатоксином, а затем и внутривыменно нативным

столбнячным анатоксином, получили сыворотку молозива с наличием

противостолбнячных антитоксинов 850-2000 АЕ/мл, из которой выделили

лактоглобулин, обладающий выраженными профилактическими и лечебными

свойствами в опытах на белых мышах, крысах, ягнятах, поросятах и жеребятах

[B. C. Барабаш, 1968].

Из сыворотки молозива коров, иммунизированных внутривыменно пуллорным

антигеном, путем осаждения сернокислым аммонием получен специфический

лактоглобулин, обладающий профилактическими свойствами в опытах на белых

мышах и на цыплятах 10-30-дневного возраста [М. Г. Кондратюк, 1970].

Из сывороток молозива коров, гипериммунизированных паратифозной вакциной

и бруцеллезным антигеном для РА, путем высаливания сернокислым аммонием при

20 % насыщении, выделен специфический паратифозный и бруцеллезный

лактоглобулин, из которого изготовили люминисцируюшие лактоглобулины для

диагностики паратифа телят и экспресс-индикации бруцелл [В. А. Атамась,

1968; В. А. Атамась, 1969].

Из сыворотки молозива коров, иммунизированных внутривыменно против

диплококковой септицемии, получен специфический лактоглобулин и испытан с

профилактической и лечебной целью в опытах на телятах. Противодиплококковый

лактоглобулин обладал довольно выраженными профилактическими и лечебными

свойствами [В. В. Май, 1970].

В ФРГ широко применяют гамма-глобулиновые препараты для профилактики и

лечения колибактериоза и налажено промышленное производство гамма-

глобулиновых препаратов из сыворотки убойных животных, сыворотки

иммунизированных животных и молозива [R. Kruedener, 1970].

Из молока коров, гипериммунизированных внутривыменно модифицированным

штаммом БУК вируса болезни Ауески получен иммунолактон против болезни

Ауески [Д. Ф. Осидзе, В. К. Муравьев, В. Т. Ночевный, В. П. Онуфриев, В. М.

Кравченко, 1972]. Авторы на основании проведенных исследований, установили

принципиальную возможность диателической иммунизации коров штаммом БУК

вируса болезни Ауески с целью получения специфической лактосыворотки и

иммунолактона. Препарат в дозе 0,5-2,0 г/кг массы тела животного обладал

выраженным профилактическим действием. Пассивный иммунитет у животных

сохранялся 21 день. Лечебный эффект отмечали только после применения

иммунолактона в первые двое суток после инфицирования животных.

Путем осаждения сернокислым аммонием молозивной сыворотки, был получен

специфический лактоглобулин который обладал профилактическими и лечебными

свойствами при экспериментальном и спонтанном заражении телят

колибактериозом [Н. С. Жосан, 1974; Н. С. Жосан, 1976].

Для получения лактоглобулина [Е. В. Гублер, А. А. Генкин, 1978]

использовали молозиво первого и второго удоев после отела коров. Молозиво

подогревали до температуры 38-40° С, затем к нему добавляли

свежеприготовленный раствор пепсина из расчета 100 мл на 900 мл молозива.

После отделения молозивной сыворотки ее фильтровали через 4-5 слоев марли,

затем через бумажный фильтр и консервировали 5 %-ным раствором фенола в 0,5

%-ном отношении к ее объему. Добавляли его при постоянном помешивании из

расчета 11,1 мл на 100 мл препарата. Выпаивали лактоглобулин телятам в

подогретом виде (38° С) в дозе 100-120 мл, первый раз за 30 мин до

кормления молозивом, второй к концу первых суток. Больным животным после

голодной диеты (8-9 ч) его давали утром до кормления один раз в сутки 2-3

дня в такой же дозе.

Из сыворотки крови отелившихся коров, находившихся в родильном отделении

не менее 10 дней В. П. Павлов, Т. Н. Грязнева, Е. В. Чичикова, 1988,

изготовили гаммаглобулин. Кровь брали у клинически здоровых животных (до 2

л от каждого). Из сыворотки крови готовили гаммаглобулин, используя 3 %-ный

раствор этакридина лактата. Новорожденным телятам через каждые 3 дня

инъецировали специфический гаммаглобулин внутримышечно в дозе 1 мл/кг массы

тела, декстрофан и тривит в дозах соответственно 5 мл и 2 мл внутримышечно,

а также в течение трех суток 2 раза в день внутримышечно вводили гентамицин

в дозе 1,5 мг/кг массы, что позволило профилактировать желудочно-кишечные

болезни у 100 % животных.

Для коррекции иммунодефицита неонатальных телят использовали

колостральную сыворотку и лактоглобулин. [Н. С. Жосан, 1992]. Препараты

вводили внутримышечно или подкожно, в дозе по 0,5 мл на кг живой массы

дважды с интервалом 24 ч. Данные препараты повышали естественную

резистентность организма, содержали неспецифические антитела против

энтеропатогенов циркулирующих, в каждом конкретном хозяйстве при условии

изготовления колостральной сыворотки и лактоглобулина, из молозива,

полученного от коров данного хозяйства.

Применение молозива и его производных (молозивный иммуногормональный

препарат, молозивная сыворотка, гидролизат казеина) снижает заболеваемость

телят диареей на 50-60%, при этом болезнь протекает в легкой форме со 100%

выздоровлением. Парентеральное введение этих препаратов новорожденным

телятам способствует повышению уровня белка в сыворотке крови в 1,5 раза,

иммуноглобулинов в 2 раза, уровень лейкоцивот у этих животных не превышал

8000, бактериальная загрязненность фекалий была в 2-3 раза ниже, чем у

телят, которым молозиво давали только внутрь. Максимальный лечебно-

профилактический эффект молозивная терапия дает в том хозяйстве, где

молозиво было получено [В. В. Бурсуков, 1993; С. В. Вальциферова, 1997].

Исходя из литературных данных, следует отметить, что иммунное молозиво,

молоко и полученные из них препараты обладают выраженными профилактическими

лечебными свойствами.

Сравнительная дешевизна сырья, используемого для получения препаратов из

молозива (практически оно не используется в хозяйствах) [М. Х. Шайхаманов,

В. П. Грамолин, Б. М. Авакаянц, 1993], простота изготовления, высокая

эффективность послужит основанием для получения указанных препаратов в

производственных условиях.

заключение

Анализируя данные литературы, касающиеся состояния естественной

резистентности и иммунологической реактивности у новорожденных телят при

колибактериозе, необходимо выделить следующие основные моменты:

. колибактериоз занимает среди заболеваний новорожденных животных

одно из ведущих мест и наносит значительный экономический ущерб;

. высокий уровень резистентности обеспечивает широкий диапазон

ответных реакций организма на влияние различных факторов внешней

среды в том числе и микроорганизмов, позволяющих ему

адаптироваться на уровне физиологической реактивности;

. животные с низким уровнем неспецифической резистентности не

способны адаптироваться к изменившимся условиям внешней среды,

что часто вызывает истощение резервной защитно-приспособительной

реактивности и, как следствие этого, приводит к гибели животных;

. сущность защитных факторов против колибактериоза телят

ассоциируется с лактоглобулиновой фракцией и уровнем К-антител-

агглютининов в сыворотке молозива коров и в сыворотке крови

новорожденных телят;

. фагоцитирующие лейкоциты, лизоцим, комплемент, пропердин и

иммуноглобулины обладают функцией антител, противомикробное

действие которых в совокупности выражается бактерицидной

активностью сыворотки крови;

. уровень иммуноглобулинов является одним из важных показателей

резистентности организма новорожденного. При этом следует

определять и учитывать иммунный статус до первой выпойки молозива

и после его скармливания;

. абсорбция колостральных иммуноглобулинов находится в прямой

зависимости от ряда факторов важнейшими из которых являются:

способность новорожденных телят усваивать их из молозива, условия

внешней среды, качество молозива и своевременная выпойка первого

молозива в адекватном количестве;

. лактоглобулин совместно с ретинолом отличаются высоким иммуно-

корректирующим эффектом и широтой профилактического действия;

. аминазин совместно с Т-активином обладают иммуно-корректирующим

действием и антисекреторной активностью ингибирующей

трансформацию аденозинтрифосфата (АТФ) в циклический 3,5-

аденозинмонофосфат (АМФ).

РАЗДЕЛ 2

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Материалы и методы исследований.

2.1.1.Общая методика. Экспериментальная часть работы выполнялась на

ферме крупного рогатого скота учебно-опытного хозяйства «Кетросу», района

Анений Ной, ОПХ «Колоница» района Криулень и в лаборатории микробиологии

кафедры эпизоотологии Государственного aграрного университета Молдовы с

1973 по 1998 год.

Опыты проводились на коровах черно-пестрой породы 5-8 лактации и на

родившихся от них телят, с целью изучения состояния неспецифической и

специфической иммунологической реактивности новорожденных телят при

колибактериозе, а также выявления роли кислотно-основного баланса в течение

инфекционного процесса, коррекции иммунодефицитного состояния новорожденных

телят. Для лечения применяли антисекреторные препараты, ингибирующие

циклический аденозинмонофосфат.

Пробы молозива отбирались в первый день (из первого, второго и третьего

доения), на второй, пятый день после отела, а на десятый, двадцатый день и

через месяц исследовалось молоко.

В сыворотке крови, молозиве и молоке изучались: динамика накопления

агглютининов, иммуноглобулиновый уровень, в т. ч. в динамике.

Сыворотку крови получали путем отстаивания, а из молозива — методом

пепсинизации. Из сывороток молозива первого и второго дня после отела

выделяли колостральную сыворотку и лактоглобулин. У родившихся телят от

опытных и контрольных групп коров в сыворотке крови изучали: динамику

накопления О- и К- антител-агглютининов, уровень иммуноглобулинов в

Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9