Методические рекомендации к определению и выведению гемограммы у животных

Последнее изменение эритробластов (кариоцитов) млекопитающих перед превращением в эритроциты состоит в исчезновении ядра (энуклеации). До сих пор ещё неясно, как это происходит. А. Максимов и ряд других исследователей полагают, что пикнотизированное ядро эритробласта всё более сдвигается к периферии клетки и, наконец, выталкивается из неё. Некоторые думают, что вытолкнутое ядро пре­вращается в кровяную пластинку. Иногда перед вы­талкиванием ядро, принимая сперва форму розетки и даже сегментов, соединённых между собою мостика­ми, подвергается распаду на отдельные осколки (кариорексис). При энуклеации эритробласта возникает эритроцит.

Большая часть исследователей считает, однако, что при физиологически нормальных условиях ядро или его осколки растворяются в клетке (кариолизис) (Паппенгейм, Негели, Заварзин).

Наконец, некоторые учёные склонны допустить наличие обоих путей освобождения эритробласта от ядра — и выталкивание его и растворение (Стражеско, Крюков, Вайденрайх, Феррата).

В. МЕГАЛОБЛАСТЫ И МЕГАЛОЦИТЫ

У молодых эмбрионов, а также в патологических условиях постэмбрионального кроветворения проэритробласты диференцируются в эритробласты не­сколько иного типа, обычно гораздо большего раз­мера, с ядром, сохраняющим в известной степени нежную сетчатость более ранних стадий развития. Такие эритробласты называются мегалобластами, а возникающие из них эритроциты (тоже обычно не­сколько более крупные и с большим насыщением ге­моглобином) — мегалоцитами. Таким образом, в пе­риод раннего эмбрионального кроветворения все эритробласты принадлежат к мегалобластам. На бо­лее поздних стадиях развития мегалобластнческое кроветворение сменяется нормобластическим и лишь в патологических условиях в костном мозгу снова встречаются мегалобласты, а в крови—мегалоциты.

В физиологической норме всё или почти всё красное кроветворение взрослых животных — нормобластическое, а сосудистая красная кровь представляет собой только нормоцитов. Этот тип эритропоэза со­храняется и в большинстве анемий, и только при пернициозной анемии наблюдается мегалобластический тип кроветворения.

До сих пор являлись неясными филогенетические и онтогенетические взаимоотношения мегалобластического и нормобластического кроветворения. Мно­гие исследователи (Эрлих, Негели, Стражеско и Янов­ский и др.) резко разграничивают эти два типа кле­ток, другие же считают, что обе эти формы — лишь крайнее выражение единого типа эритропоэза, и никакой принципиальной разницы между нормобластами и мегалобластами не существует (Крюков, Паппенгейм). По А. Н. Крюкову, «мегалобластическое кроветворение является в результате превалирова­ния клеточного размножения над дифференциацией. Мегалобласты размножаются и созревают, не дифференцируясь, в нормобласты. Кроветворение остаётся на эмбриональной мегалобластической ступени вслед­ствие повышенного регенеративного требования и отравления организма ядом, вызвавшим заболева­ние. Различие между мегалобластическим и нормо-бластическим кроветворением — только в степени реакции кроветворительной ткани. Нормальный эритропоэз идёт за счёт размножения существующих в костном мозгу эритробластов. Мегалобластический эритропоэз задевает глубже эритропоэтические по­тенции кроветворительной ткани, и эритроциты воз­никают из первичных базофпльных лимфоидных кле­ток, мобилизуемых в случаях крайней надобности и исключительной потребности. Тюрк (Turk) думает, что чем дальше продвигается предсозревание не со­держащих гемоглобина эритробластов, прежде чем начнётся образование гемоглобина, тем больший нормобластический характер обеспечен за возникающими эритробластами, так как за это время предсозревания базофильный эритробласт в своём ядре и прото­плазме делается меньше, некоторым образом концент­рируется. Чем быстрее наступает образование гемо­глобина, тем клетка больше и тем больше и нежнее структурировано ядро, т. е. тем ближе клетка к ме-галобласту. Поэтому и первоначальный эритропоэз у эмбриона имеет мегалобластический тип, где при­митивные эритробласты являются производными мезенхимных элементов, вторичный же эрптропоэз эмбриона возникает уже из лимфоидных предстадий, имеющих время подготовиться к образованию эри-тробласта. Возможно, что у эмбриона первоначальная усиленная потребность в красных элементах удовле­творяется спешной пролиферацией этих клеток, дп-ференциация же их запаздывает. Только когда разви­вающийся организм обеспечивается красными клет­ками в известной степени, становится возможным бо­лее надёжный и более стойкий эритропоэз нормобластического типа».

Открытие «фактора вызревания эритроцитов» (об­разуется в стенке желудка и концентрируется в пече­ни), способствующего переходу мегалобластов в эритробласты, выясняет отношения между последними. Сабин считает мегалобластов нормальной промежу­точной формой при эритропоэзе. В его схеме имеются следующие стадии вызревания эритроцита:

Ретикулярная клетка

«Примитивная клетка»

Мегалобласт

Ранний эритробласт

Поздний эритробласт

Нормобласт

Полихроматопит или ретикулоцит

Зрелый эритроцит.

Г. РЕГЕНЕРАТИВНЫЕ И ДЕГЕНЕРАТИВНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ КРАСНЫХ КРОВЯНЫХ ТЕЛЕЦ

Регенеративные изменения в эритроцитах наблю­даются при усиленном эритропоэзе. Полное вызре­вание эритроцита может при этом несколько нару­шаться, давая необычные для нормальной крови формы, и в сосудистую кровь могут поступать не совсем зрелые формы красных кровяных телец, иногда даже самые ранние их предстадии.

Примером регенеративных нарушений нормально­го типа созревания эритроцитов является прежде­временная энуклеация ядра, в то время как цито­плазма, сохраняя присущие юным клеткам нуклеино­вые кислоты и не накопив гемоглобина, остаётся ещё базофильной или полихроматофильной. Отсюда появ­ление в сосудистой крови полихроматофильных или даже базофильных эритроцитов. Иногда базофилия цитоплазмы сохраняется в виде небольших участков, пятен, островков на ортохромной поверхности эри­троцита. В этом случае появляются базофильно пунк­тированные эритроциты. Наконец, в созревшем эри­троците могут сохраниться остатки ядра — в виде отдельных обломков (азурофильная пунктация, тель­ца Жоли) или в виде остатков ядерной оболочки (кольца Кабота) (Cabot).

Иногда, наоборот, созревание ядра при стимули­рованном эритропоэзе отстаёт от созревания цито­плазмы. В этом случае дифференцированная, ортохро­матическая цитоплазма окружает незрелое, нежно структурированное ядро. Аналогичное явление по­лучается при ускоренном созревании цитоплазмы.

Все эти, сами по себе патологические отклонения в созревании эритроцитов свидетельствуют об усилен­ном новообразовании красных кровяных телец, их регенерации, о регенеративных сдвигах в красном костном мозгу.

Однако существуют и такие изменения эритроци­тов, которые происходят при угнетении эритропоэза какими-либо вредными воздействиями, ведущими к явлениям дегенерации в красном костном мозгу. Такие дегенеративные изменения выражаются в изме­нении величины (анизоцитоз), формы (пойкилоцитоз) и окрашиваемости (появление гипер- и гипохромных форм) эритроцитов.

В процессе созревания регенеративные формы, под влиянием вредных воздействий, могут также подвер­гаться дегенеративным изменениям: в этом случае в эритроцитах возникают смешанные, дегенеративно-регенеративные изменения.

«Относительно истинного значения различных па­тологических форм красных кровяных элементов не существует полного единодушия во взглядах, и то, что одними признаётся за дегенеративные изменения, другие то же самое считают регенеративными изме­нениями. Но в общем, исходя лишь из морфологи­ческих изменений клетки при прогрессивной дифференциации её, можно составить правильное и последова­тельное представление и о патологии эритроцитов» (А. Н. Крюков).

Следует иметь в виду, что малые дозы кровяных ядов влияют на кроветворную систему стимулирую­ще, вызывая, главным образом, явления регенера­ции (хотя в небольшой степени вызывают и дегене­ративные изменения в эритроцитах). При больших дозах кровяных ядов превалируют явления дегене­рации, хотя в какой-то степени можно уловить и реге­неративные изменения эритроцитов. Только при очень больших дозах кровяных ядов дегенерация совершенно подавляет всякие признаки регенерации.

Полихроматофилы, ретикулоциты и базофильно пунктированные эритроциты. Одним из основных регенеративных признаков красной крови является нахождение в мазке полихроматофилов, ретикулоци-тов и базофильно пунктированных эритроцитов.

При обычной окраске по Романовскому полихромазия выявляется по синевато-фиолетовой или розово-фиолетовой окраске эритроцитов. При суправиталь-ной окраске спиртовым раствором бриллианткрезилголубой зрелые эритроциты окрашиваются в зелёный цвет, а в молодых, недозрелых формах обнаруживают­ся нежные яркосиние сеточки (ретикулоциты) или отдельные темносиние точки и пятнышки (базофиль­но пунктированные эритроциты).

Объяснение этому заключается в самой сущности вызревания цитоплазмы. Юная цитоплазма богата нуклеиновыми кислотами, делающими её резкобазофильной (Кедровский). Нуклеиновые кислоты играют большую роль в синтезе белков, в частности, глобу­линов в лимфоцитах и, повидимому, гемоглобина в эритробластах. По мере вызревания красных кровя­ных клеток, базофилия цитоплазмы исчезает, так как количество нуклеиновых кислот в ней уменьшается. Но, при усиленной регенерации, у молодых, посту­пающих в сосудистую кровь ещё несозревшими, эри­троцитов, базофилия частично сохраняется в виде полихромазии, если вся цитоплазма ещё диффузно содержит много нуклеиновых кислот, или в виде ба-зофильной пунктации, если нуклеиновые кислоты сосредоточены в отдельных местах эритроцита.

Количество полихроматофильных эритроцитов в нормальной крови лошади и коровы очень невелико (не более 1—3 на тысячу ортохромных эритроцитов). У всех молодых животных, а у свиней, собак, морских свинок и крыс — также и во взрослом состоянии, полихроматофилов значительно больше. Особенно много полихроматофилов у новорождённых.

При анемиях и некоторых других заболеваниях, при усилении регенерации в красном костном мозгу, количество полихроматофилов в сосудистой крови резко возрастает.

Изменения в эритроцитах, связанные с сохране­нием остатков распада ядра. а) Красная полихроматофилия, красная пунктация и красная штриховатостъ эритроцитов.

При окраске по Романовскому в эритроцитах можно наблюдать не только базофильную, но и азурофильную полихромазию и пунктацию. В этом последнем случае, благодаря избирательному по­глощению азура, эритроцит или целиком окрашен в красно-фиолетовый цвет (красная полихромазпя) или в нём обнаруживается красно-фиолетовая (крас­ная) пунктация в виде отдельных точек или глыбок. Повидимому, азурофильная полихромазия возни­кает при растворении ядерной субстанции и хрома­толизе, а азурофильная пунктация — при распаде ядра на отдельные, очень маленькие глыбки (кариорексис).

Того же происхождения и красная штриховатость эритроцитов, особенно подробно изученная Негели. Она выражается в наличии в эритроцитах отдельных красных (красно-фиолетовых) пятнышек и штри­хов.

В норме красная полихромазия и пунктация эри­троцитов не встречаются ни у взрослых животных, ни у молодых. Эти явления наблюдаются только при тя­жёлых анемических состояниях.

б) Хроматиновая пылинка Вайдеирайха, тельца Говелл—Жоли и кольца Кабота в эритроцитах. Более крупные, сохранившие ещё остаток структуры, ядерные остатки в эритроците дают так называемые тельца Говелл—Жоли, хроматиновую пылинку Вайденрайха и кольца Кабота.

Хроматиновая пылинка Вайденрайха — это по­следний остаток хроматина ядра в виде тонкого, ко­роткого штриха, зёрнышка, «пылинки», окрашиваю­щейся в вишнёво-красный цвет по Романовскому. Предположение, что это остаток центрозомы, мало вероятно.

Тельца Говелл—Жоли — несколько более круп­ные ядерные обломки (хроматиновые глыбки), даю­щие характерные тинкториальные реакции хромати­на. По Романовскому они окрашиваются в вишнёво-красный цвет, метилгрюнпиронином — в зелёный. Они окрашиваются также гематоксилином. Наличие этих телец указывает на не вполне закончившийся распад и растворение ядра и, следовательно, на юность красного кровяного тельца.

Кольца Кабота представляют, по-видимому, остатки ядерной оболочки или периферического слоя ядра, образующие замкнутые тонкие кольца, часто в виде цифры 8 или сложных петель. Они окрашиваются азуром в вишнёво-красный цвет.

По А. Н. Крюкову, «они суть патологические про­дукты, возникающие в результате необычного процес­са энуклеации при помощи кариолиза и вакуолиза­ции в противность нормальной центропетальной ре­дукции ядра (Паппенгейм) или выталкиванию ядра (Максимов). Они являются выражением процесса созревания исключительно патологического (Феррата). Но в то же время служат симптомом регенерации и характеризуют недозрелость красного элемента».

Они появляются, и то не всегда, лишь при тяжёлых анемических и лейкемических процессах.

Изменения величины и формы эритроцитов. Изме­нения величины и формы эритроцитов, особенно гру­бые и значительные, сигнализируют о дегенеративных изменениях в кроветворной системе.

К таким изменениям принадлежат:

а) Анизоцптоз — появление в сосудистой крови эритроцитов различного, не типичного размера. Формы, большие чем обычный эритроцит (нормоцит), называются макроцитами, формы меньшие — микроцитами. Эритроциты ненормальных размеров воз­никают иногда из соответствующих материнских кле­ток — макро- и микроэритробластов. Чаще, однако, они образуются при сморщивании или «набухании» нормоцитов.

Слабый анизоцитоз не обязательно связан с дегене­рацией красного костного мозга. Он обычен у очень молодых сельскохозяйственных и, особенно, лабора­торных животных.

Сильно выраженный анизоцитоз — всегда признак дегенерации эритропоэтической системы.

б) Пойкилоцитов — появление в сосуди­стой крови эритроцитов ненормальной, дегенеративной формы. Они могут быть похожи на грушу, гимна­стическую гирю, бисквит или имеют своеобразные длинные отростки. Края пойкилоцитов часто неров­ные, зубчатые или гофрированные.

Выступы эритроцитов могут отшнуровываться, получаются маленькие округлённые обломки — шистоциты. Такое отшнуровыванпе, смотря по своему характеру, называется плазморексисом и плазмо-шизом.

Крупные шистоциты легко смешать с микроцитами. Однако у последних всегда имеется типичная, более бледная окрапшваемость центра клетки, чего нет у шистоцнта.

По А. Н. Крюкову, «пойкилоцитоз можно рассмат­ривать, как дальнейшую дегенеративную ступень анизоцитоза. Пойкилоциты и шистоциты возникают на периферии, но для их происхождения, повиди-мому, требуется продукция костным мозгом весьма мало устойчивых элементов, легко поддающихся изменению под влиянием изменившейся в физико-химическом отношении кровяной плазмы».

в) Анизохромия — ненормально слабая или слишком сильная окрашиваемость эритроцитов (гипо- и гиперцитохромия). В основе их лежат, несом­ненно, колебания насыщенности эритроцита гемогло­бином. В случаях резко выраженной г и п о х р о-м и и центр эритроцита почти или совсем не окраши­вается, — возникают так называемые кольцевидные формы эритроцитов. Это особенно характерно для хло­роза. Гипохлороз не всегда ведёт к обеднению крови гемоглобином. Иногда (чаще временно) недостаточная насыщенность эритроцитов гемоглобином может ком­пенсироваться повышенным их количеством — поли-цитемией. Гиперхром и я особенно характерна при пернициозной анемии. (Но, например, при ни-кроцитарной гиперхромной анемии гиперхромия связана с утолщением клеток за счёт уменьшения их диаметра.)

г) Полулунные тела. Резко выраженной дегенеративной формой эритроцитов являются полу­лунные тела. Это бледные, почти бесцветные диски, размером в 10—15 µ а более, ограниченные бледно-фиолетовым слоем. У очень больших полулунных тел этот слой весьма узок. Разорвавшиеся полулунные тела дают серповидные формы, нередко с изогнуты­ми, как бы извивающимися концами.

По А. Н. Крюкову, эти образования можно рас­сматривать «как происходящие в результате процесса физиологической инволюции нормальных эритроци-тов, так как они встречаются в значительном коли­честве у совершенно здоровых индивидуумов». Обра­зование полулунных тел происходит таким образом, «что эритроциты делаются бледнее и метахроматич-ными, далее вакуолизируются, вакуоля в эритроци­те увеличивается, субстанция же эритроцита окру­жает эту вакуолю серповидно, причём одновременно сильно увеличиваются размеры инволюционной фор­мы.

В дальнейшем, вследствие разрыва стенки ва­куоли, получаются свободные серпы или полулуния. Действительно, подобные формы весьма нередко при­ходится видеть в крови, не обнаруживающей дегене­ративных признаков».

Метгемоглобинемические внутренние тельца в эри­троцитах. При дегенерации эритроцитов под влия­нием таких кровяных ядов, как фенилгидразин, нит­робензол, пиридин, в эритроцитах возникают внутри­клеточные метгемоглобиновые образования — так называемые тельца Эрлиха — Гейнца.

При супровитальной окраске метилвиолетом они окрашиваются в интенсивный синий цвет, а нильсульфатголубая окрашивает их в зеленовато-синий цвет. Они избирательно окрашиваются кислыми крас­ками.

Обычно в эритроците находится одно тельце Гейн­ца. Оно расположено или центрально, или более или менее эксцентрично, а иногда даже выпячивается наподобие клювика за контуры клетки.

Возможно, что тельце образовано не из чистого гемоглобина: кроме метгемоглобина (или, быть может, другого очень стойкого деривата гемоглобина), в нём находили липиды, связанный с белками диаминофосфатид, немного холестерина. С несомненностью до­казано присутствие в тельцах железа и пиррольных колец. Тельца Эрлиха — Гейнца химически очень стойки, — они не растворяются в пирогаллоле, воде, эфире и бензине и противостоят действию сапонина.

Общая оценка регенеративных и дегенеративных изменений эритроцитов. Классификация патологи­ческих изменении красной крови. А. Н. Крюков де­лает следующий прекрасный анализ взаимоотноше­ний регенеративных и дегенеративных изменений в красной крови:

«При сколько-нибудь выраженном малокровии картина крови даёт одновременно регенеративные и дегенеративные изменения эритроцитов. Как среди первых, так и среди вторых имеются градации, ко­торые дают возможность судить о степени поражения кроветворительного аппарата, о тяжести заболева­ния. Наиболее лёгкая степень регенерации опреде­ляется полихроматофилией эритроцитов, как выра­жением ускоренной эритропоэтической деятельно­сти костного мозга. Более повышенная функция сопровождается появлением базофпльной пунктации» (она имеет место и у ядерных эритроцитов птиц. — В. Н.), «далее — эритроцитов с тельцами Жоли, ещё далее — нормобластов. Появление мегалобла-стов будет указанием на гиперфункцию, на энтдиф-ференциацию кроветворительной ткани, когда нор­мальная регенерация уже становится недостаточной. Точно так же по дегенеративным изменениям эри­троцитов можно судить о тяжести процесса. Я вления гипохромии и анизоцитоза будут менее значитель­ными изменениями, чем пойкилоцитоз и шистоцитоз, где деформируются и разрушаются эритроциты. Базируясь на степенях обоего рода изменений в эри­троцитах, можно лишь до известного предела строить масштаб анемического состояния, потому что суще­ствуют и такие формы малокровии, где, несмотря на незначительные морфологические изменения в крови, тем не менее тяжесть страданий безмерна, благодаря арегенеративному состоянию кроветворительного ап­парата. Точно так же стремления конструировать специфические картины эритроцитарных изменений, которые бы характеризовали определённые болез­ненные формы, оказываются по существу несостоя тельными и возможны только в узких траницах. Так, центральная гипохромия присуща хлорозу, гиперхромия и мегалобластоз — пернициозной ане­мии. Однако, и другие болезненные процессы могут протекать с этими картинами. Если регенеративная картина крови есть отображение того, что происхо­дит в кроветворительной ткани, то дегенеративные изменения эритроцитов являются в результате воз­действия вредных влияний на эритроциты в перифе­рической крови, а также следствием непосредствен­ного отравления кроветворительной ткани».

«...Действительная картина крови есть симптом регенеративного и дегенеративного взаимодействий».

Различные степени патологических изменений кро­ви часто систематизируют в такие четыре категории.

Предварительная стадия. Раздра­жение (достаточно простого уменьшения количества, благодаря потере крови) вызывает немедленное пря­мое поступление в кровь резервных клеток (при более сильной степени раздражения — нормальных юных форм) вследствие хемотаксиса или, что более веро­ятно, вследствие васкулярной гиперемии, быть может регулируемой вегетативной нервной системой, — кратковременная картина крови при раздражении.

1. Скрытая регенерация. Костный мозг в состоянии начинающейся гипертрофии. На периферии обыкновенно находят значительное уве­личение числа пластинок и умеренный лейкоцитоз. Выраженные юные формы ещё отсутствуют. В норме непродолжительная промежуточная стадия (2— 3 дня), — псевдоапластические или олигоцитотические картины крови (степень 1а).

2. Простая регенерация. Увеличение полихромазии и её подвидов — признак усиленной, ускоренной деятельности кроветворных органов (ги­пертрофия костного мозга); при наличии токсического фактора — базофильная пунктацпя, — полихромати­ческая картина крови (степень IIа).

3. Усиленная регенерация. Резкая полихромазия, юные формы большей величины (макроцитоз), общий анизоцитоз вследствие усиленного образования и поступления в кровь незрелых, от­части ядросодержащих элементов (нормо- и эритробласты): костный мозг в общем гипертрофирован, в состоянии прогрессирующего красного перерожде­ния (метаплазия); при наличии токсического фак­тора — обрывки ядер, — нормобластическая кар­тина крови (степень IIIа).

4. Гиперрегенерация. Общее нарушение образования эритроцитов и поступление в кровь действительно новообразованных (изменивших форму или «эмбриональных», богатых гемоглобином, гиперхромных) юных форм: мегалобластов, мегалоцитов и вообще всех дегенеративных форм, указывающее на нарушение нормальной регенерации (прогресси­рующая мегалобластическая гиперплазия костного мозга),— мегалобластическая (пернициозная) карти­на крови (степень IV. а и б).

Н. Д. Стражеско и Д. Н. Яновский утверждают,

что нарушения нормальной регенерации при мегалобластозах нет и что при гиперхромных анемиях типа Бирмера одновременно производятся как нормоциты, так и мегалоциты.

Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8